牛肉膏蛋白胨培养基培养什么菌(牛肉膏蛋白胨培养基)

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1、操作步骤

2、 1.称量

3、 按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、nacl放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量,用热水溶化后倒入烧杯。也可放在称量纸上,称量后直接放入水中,这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片。蛋白胨很易吸潮,在称取时动作要迅速。另外,称药品时严防药品混杂,一把牛角匙用于一种药品,或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品,瓶盖也不要盖错。

4、 2.溶化

5、 在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后,在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中,再加热溶化,在琼脂溶化的过程中,需不断搅拌,以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。

6、 3.调ph

7、 在未调ph前,先用精密ph试纸测量培养基的原始ph值,如果ph偏酸,用滴管向培养基中逐滴加入1mol/l naoh,边加边搅拌,并随时用ph试纸测其ph值,直至ph达7.6。反之,则用1mol/l hcl进行调节。注意ph值不要调过头,以避免回调,否则,将会影响培养基内各离子的浓度。

8、 对于有些要求ph值较精确的微生物,其ph的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书)。

9、 4.过滤

10、 趁热用滤纸或多层纱布过滤,以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下,这一步可以省去(本实验无需过滤)。

11、 5.分装

12、 按实验要求,可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图ⅴ-1。

13、 分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。

14、 (1)液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。

15、 (2)固体分装分装试管,其装量不超过管高的1/5,灭菌后制成斜面,如图ⅴ-2。分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。

16、 (3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。

17、 6.加塞

18、 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞,以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能(棉塞制作方法附本实验后面)。

19、 7.包扎

20、 加塞后,将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好。用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞后,外包牛皮纸,用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开,同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。

21、 8.灭菌

22、 将上述培养基以1.05kg/cm2(15磅/英寸2),121.3℃, 20分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌,则应放入冰箱内暂存。

23、 9.搁置斜面

24、 将灭菌的试管培养基冷至50℃左右,将试管棉塞端搁在玻棒上,搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。

25、 10.无菌检查

26、 将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时,以检查灭菌是否彻底。

本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。

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